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米米℃

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩增不出条带 已有1人参与

pcr扩增不出想要的条带,重复多次,改变试剂也不行,是相应基因片段缺失吗?如果是这样,该怎么改变扩增策略呢?谢谢大家了!

@biostar2009 发自小木虫Android客户端
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)

VX:19192310212;公众号:生物技术与IVD
2楼2021-04-08 22:32:56
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grm枫

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1、做阳性对照,能扩增出来说明引物没问题、试剂没问题;
2、查看GC含量;含量高使用GCbuffer;
3、DNA质量是否有问题,调整合适的浓度;
4、做巢式pcr
3楼2021-04-14 11:01:47
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琛琛:

新虫 (正式写手)

4楼2021-04-15 08:12:38
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米米℃

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by snoopyzxx at 2021-04-08 22:32:56
关键是阳性和阴性对照。

只做了阴性对照

发自小木虫Android客户端
5楼2021-04-21 19:09:39
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米米℃

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by grm枫 at 2021-04-14 11:01:47
1、做阳性对照,能扩增出来说明引物没问题、试剂没问题;
2、查看GC含量;含量高使用GCbuffer;
3、DNA质量是否有问题,调整合适的浓度;
4、做巢式pcr

好的谢谢,我修改一下体系

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6楼2021-04-21 19:10:10
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