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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR扩增不出条带
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米米℃

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩增不出条带 已有1人参与

pcr扩增不出想要的条带，重复多次，改变试剂也不行，是相应基因片段缺失吗？如果是这样，该怎么改变扩增策略呢？谢谢大家了！

@biostar2009 发自小木虫Android客户端
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1楼 2021-04-08 19:07:36
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snoopyzxx

木虫 (著名写手)
关键是阳性和阴性对照。

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VX：19192310212；公众号：生物技术与IVD
2楼2021-04-08 22:32:56
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grm枫

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1、做阳性对照，能扩增出来说明引物没问题、试剂没问题；
2、查看GC含量；含量高使用GCbuffer；
3、DNA质量是否有问题，调整合适的浓度；
4、做巢式pcr
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3楼2021-04-14 11:01:47
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琛琛：

新虫 (正式写手)
引物有做过check吗

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4楼2021-04-15 08:12:38
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米米℃

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by snoopyzxx at 2021-04-08 22:32:56
关键是阳性和阴性对照。

只做了阴性对照

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5楼2021-04-21 19:09:39
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米米℃

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by grm枫 at 2021-04-14 11:01:47
1、做阳性对照，能扩增出来说明引物没问题、试剂没问题；
2、查看GC含量；含量高使用GCbuffer；
3、DNA质量是否有问题，调整合适的浓度；
4、做巢式pcr

好的谢谢，我修改一下体系

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6楼2021-04-21 19:10:10
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