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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助】降低载体自连有哪些方法？
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limengfei

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】降低载体自连有哪些方法？

求 牛人 解答。


多谢！！！

[ Last edited by amisking on 2010-2-19 at 19:04 ]
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1楼 2009-08-08 10:19:17
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ytmito1986

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用去磷酸化酶处理下，在做个胶回收
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2楼2009-08-08 11:03:42
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spiderboy

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-8 13:55
除了T载体外的其他载体，基本都要做去磷酸处理，然后胶回收。。
如，单酶切时肯定要处理的；双酶切的也要处理，因为双酶切有时候会有切不干净的情况，有单酶切的情况出现，因此，去磷处理可以降低背景；平端载体去鳞那是更要的了
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3楼2009-08-08 13:46:02
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huanshi

银虫 (小有名气)
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-8 14:40
去磷酸化
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4楼2009-08-08 13:52:47
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695

木虫 (职业作家)
我也赞同去领酸化处理
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5楼2009-08-08 18:00:28
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louyiceng
★
limengfei(金币+1):谢谢参与
6楼2010-02-18 13:24:26
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695

木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
去磷酸化,30-45min is enough
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7楼2010-02-18 16:24:18
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段家一凡

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
去磷酸化后自连，然后电泳回收没有连上的即可。
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8楼2010-02-18 20:35:09
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wangqk198738

金虫 (正式写手)

这个东西我也一直在寻求

导师也告诉我多找找这个东西，不能白费钱，。
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9楼2010-02-19 18:37:35
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我提供一种：酶连前载体45°，水浴5分钟，迅速置冰上，加入BUFFER等，可以使自连的片段打开
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帮助虫友，提升自己
10楼2010-02-21 21:45:20
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