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JH5HJ

禁虫 (正式写手)

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JH5HJ

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4楼2021-04-01 14:13:31
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ameba

新虫 (初入文坛)

这个没有背景介绍,无法分析

发自小木虫Android客户端
2楼2021-04-01 08:09:36
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小野说

新虫 (初入文坛)

这种情况还是比较少见的,因为你说的载体还是比较常见的,相比pGEX,pet还是有一些不同的,我想问一下,你采用化转的时候,转化子是不是非常多?
3楼2021-04-01 11:02:04
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小野说

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by JH5HJ at 2021-04-01 14:13:31
完整质粒转化到大肠杆菌中,阳性的转化子肯定很多呀
...

结果一样有两种情况,第一种是有表达,第二种是没表达。代表的问题是不一样的。首先要确认是否存在表达。从你的情况我感觉是没有表达,质粒构建正确是第一步,其中你要确认读码框是正确读码的,这很重要。其次要看是否存在稀有密码子。以上2点要确认好。质粒构建和转化都很容易,但转化子不要特别多,我之前的一个项目就是这个问题导致的假阴性。
5楼2021-04-01 16:55:17
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