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c3024034

银虫 (正式写手)

[交流] 【交流/求助】质粒提取求助

为什么经过3种抗生素筛选后,还是提不出质粒???可能是致力丢失吗?


我的是一种农杆菌 里面的质粒有绿色荧光蛋白基因  现在我想设计一对引物把这个基因钓出来  但却没成功  我觉的是不是质粒丢失了 但如果丢失 那为什么可以抗抗生素

[ Last edited by amisking on 2010-1-11 at 17:26 ]
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水心

金虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
农杆菌的质粒拷贝数太低,提取出来浓度很小。如果只想克隆基因的话,可以试试菌落PCR
9楼2009-08-09 11:23:21
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juke9910

铜虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 8-8 23:30
能不能把问题说清楚呢?怎么提不出来?我以前遇到过挑单克隆摇管的时候,摇出来的菌液发白,离心下来的菌体很白,用Tiangen的试剂盒加上P2不能澄清,加入P3沉淀异常,听别人说是酵母污染,也不知道怎么回事。不知道你是不是这种情况呢
2楼2009-08-07 18:57:34
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695

木虫 (职业作家)

没遇到过,不好意思
3楼2009-08-07 19:38:05
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c3024034

银虫 (正式写手)

我的是一种农杆菌 里面的质粒有绿色荧光蛋白基因  现在我想设计一对引物把这个基因钓出来  但却没成功  我觉的是不是质粒丢失了 但如果丢失 那为什么可以抗抗生素
4楼2009-08-07 20:10:10
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