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十比木虫 (著名写手)
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RT-PCR 紧急求助
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RT-PCR 紧急求助！！ 现要P一个数据库中推定基因的ORF，但碥码区5‘与3’端的GC含量相差太大，我设计了两对引物，都没有P出任何条带了，我用其它的基因验证过cDNA的，应该没有问题？ 我所要P的基因的5‘端包括UTR的GC含量非常高，但整个ORF的总体GC含量又不高，这种基因大家一般怎么设计引物啊？ 请高手指点一下，很急啊？？ 万分感谢！ |
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清泉
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9楼2009-08-07 22:49:15
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greatsun
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4楼2009-08-07 14:52:34
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建议用primer premier5软件设计引物，根据引物设计的原则设计引物， 然后到一个国内的在线引物评估软件上评估一下(09年发表在bioinformatics上)， 很好用的(http://biocompute.bmi.ac.cn/MFEprimer/)。 一般情况这个在线软件能评估到你的引物合不合适。 希望对你有用吧。 [ Last edited by greatsun on 2009-8-7 at 15:08 ] |
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