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十比木虫 (著名写手)
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[交流]
RT-PCR 紧急求助
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RT-PCR 紧急求助！！ 现要P一个数据库中推定基因的ORF，但碥码区5‘与3’端的GC含量相差太大，我设计了两对引物，都没有P出任何条带了，我用其它的基因验证过cDNA的，应该没有问题？ 我所要P的基因的5‘端包括UTR的GC含量非常高，但整个ORF的总体GC含量又不高，这种基因大家一般怎么设计引物啊？ 请高手指点一下，很急啊？？ 万分感谢！ |
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加油啊，我对引物设计也是不在行，只能在精神上安慰你了 
11楼2009-08-08 00:41:21
3楼2009-08-07 13:59:59
greatsun
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 4785.2
- 帖子: 814
- 在线: 234.4小时
- 虫号: 181273
- 注册: 2006-02-10
- 性别: GG
- 专业: 神经生物学
4楼2009-08-07 14:52:34
greatsun
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-7 15:17
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建议用primer premier5软件设计引物，根据引物设计的原则设计引物， 然后到一个国内的在线引物评估软件上评估一下(09年发表在bioinformatics上)， 很好用的(http://biocompute.bmi.ac.cn/MFEprimer/)。 一般情况这个在线软件能评估到你的引物合不合适。 希望对你有用吧。 [ Last edited by greatsun on 2009-8-7 at 15:08 ] |
5楼2009-08-07 15:05:37
