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夏至已远

新虫 (著名写手)

[求助] 选择一抗二抗的原则是什么 已有1人参与

小弟学化学的,现在需要跑个WB不知道怎么选择一抗二抗,请各位大哥大姐指导一下

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海燕追梦

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 海燕追梦 at 2021-03-21 09:58:03
二抗根据一抗选,一抗选择看看是多抗还是多抗,需要哪种种属的。。。。。文献用哪个你就用哪个靠谱

多抗还是单抗

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3楼2021-03-21 09:58:30
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海燕追梦

新虫 (正式写手)

二抗根据一抗选,一抗选择看看是多抗还是多抗,需要哪种种属的。。。。。文献用哪个你就用哪个靠谱

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2楼2021-03-21 09:58:03
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抗体小公举

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

一抗和二抗的区别:
一抗即第一抗体:就是能和特异性抗原特异性结合的蛋白,包括单克隆抗体和多克隆抗体。

二抗即第二抗体:能和一抗结合,即抗体的抗体,是利用一抗的Fc段(恒定区,每个种属的Fc段都相同)去免疫异种动物,由异种动物的免疫系统产生的针对此抗体的免疫球蛋白,起放大一抗信号的作用。

一抗分为单抗和多抗:
1. 多抗
优点:亲和性比单抗高;无表位被掩盖的顾虑放大低表达靶蛋白的信号
缺点:引入较高的背景信号;存在批次差异

2. 单抗:
优点:单抗的特异性高,杂带少;在一段时期内较为稳定
缺点:有表位被掩盖的顾虑

选择一抗时,要考虑到该抗体的种属,抗体的反应种属,抗体的应用类型等等
选择二抗时,要根据一抗的种属进行选择。
4楼2021-04-30 15:27:37
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