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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 选择一抗二抗的原则是什么
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夏至已远

新虫 (著名写手)

[求助] 选择一抗二抗的原则是什么 已有1人参与

小弟学化学的，现在需要跑个WB不知道怎么选择一抗二抗，请各位大哥大姐指导一下

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1楼 2021-03-20 20:11:12
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海燕追梦

新虫 (正式写手)
二抗根据一抗选，一抗选择看看是多抗还是多抗，需要哪种种属的。。。。。文献用哪个你就用哪个靠谱

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2楼2021-03-21 09:58:03
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海燕追梦

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 海燕追梦 at 2021-03-21 09:58:03
二抗根据一抗选，一抗选择看看是多抗还是多抗，需要哪种种属的。。。。。文献用哪个你就用哪个靠谱

多抗还是单抗

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3楼2021-03-21 09:58:30
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抗体小公举

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

一抗和二抗的区别：
一抗即第一抗体：就是能和特异性抗原特异性结合的蛋白，包括单克隆抗体和多克隆抗体。

二抗即第二抗体：能和一抗结合，即抗体的抗体，是利用一抗的Fc段（恒定区，每个种属的Fc段都相同）去免疫异种动物，由异种动物的免疫系统产生的针对此抗体的免疫球蛋白，起放大一抗信号的作用。

一抗分为单抗和多抗：
1. 多抗
优点：亲和性比单抗高；无表位被掩盖的顾虑放大低表达靶蛋白的信号
缺点：引入较高的背景信号；存在批次差异

2. 单抗：
优点：单抗的特异性高，杂带少；在一段时期内较为稳定
缺点：有表位被掩盖的顾虑

选择一抗时，要考虑到该抗体的种属，抗体的反应种属，抗体的应用类型等等
选择二抗时，要根据一抗的种属进行选择。
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4楼2021-04-30 15:27:37
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