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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 金币求助：关于梯度洗脱遇到的一个问题
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dandanxiong1983

金虫 (小有名气)

[交流] 金币求助：关于梯度洗脱遇到的一个问题

最近作课题遇到一个关于HPLC的一个很棘手的问题， 要同时测定香附中多个化合物的含量，总共六个化合物的同时测定，采用了梯度洗脱，但是其中脂溶性很大的化合物Caryophllene oxide(氧化石竹烯）怎么也洗不下来，但是用同样的柱子在100%甲醇下5min就可以出来，梯度的设置中100%的甲醇有35分钟，还是洗不下来，请问问题出在哪里？请高手给予指点。
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1楼 2009-08-06 09:05:34
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dandanxiong1983

金虫 (小有名气)
原因找到拉，和大家分享下，是因为加了酸的缘故，
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9楼2009-08-06 16:01:03
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chinabull

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
clkk216(金币+1):谢谢参与
dandanxiong1983(金币+1,VIP+0): 8-6 10:25
不知道你用的是线性梯度，还是台阶梯度。如果是线性梯度的话，可以计算一下什么时间流动相为100%甲醇，然后应该就可以大概知道什么时间出峰了。如果是台阶梯度就比较简单了，应该可以大概推算出峰时间的。感觉应该是没有问题的。如果不确认是不是已经出峰，可以单独进样Caryophllene oxide，考察一下。
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2楼2009-08-06 09:12:21
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ddw888

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
clkk216(金币+1):谢谢参与
dandanxiong1983(金币+1,VIP+0): 8-6 16:02
dandanxiong1983(金币+1,VIP+0): 8-8 19:58
引用回帖:
Originally posted by dandanxiong1983 at 2009-8-6 09:05:
最近作课题遇到一个关于HPLC的一个很棘手的问题， 要同时测定香附中多个化合物的含量，总共六个化合物的同时测定，采用了梯度洗脱，但是其中脂溶性很大的化合物Caryophllene oxide(氧化石竹烯）怎么也洗不下来，但 ...

1.首先你如何判断未洗脱下来
2.梯度条件下对照品出峰在什么位置
3.有无Caryophllene oxide对照品，若没有你很难判断，可能要借助联用技术
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3楼2009-08-06 09:55:26
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dandanxiong1983

金虫 (小有名气)
单独进样时，是可以出峰的。100%甲醇单独洗脱时5min就出来了，请问线性梯度怎么看的，包括计算方法又是怎样的？
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4楼2009-08-06 10:22:26
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