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dandanxiong1983

金虫 (小有名气)

[交流] 金币求助:关于梯度洗脱遇到的一个问题

最近作课题遇到一个关于HPLC的一个很棘手的问题, 要同时测定香附中多个化合物的含量,总共六个化合物的同时测定,采用了梯度洗脱,但是其中脂溶性很大的化合物Caryophllene oxide(氧化石竹烯)怎么也洗不下来,但是用同样的柱子在100%甲醇下5min就可以出来,梯度的设置中100%的甲醇有35分钟,还是洗不下来,请问问题出在哪里?请高手给予指点。
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chinabull

至尊木虫 (著名写手)

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clkk216(金币+1):谢谢参与
dandanxiong1983(金币+1,VIP+0): 8-6 10:25
不知道你用的是线性梯度,还是台阶梯度。如果是线性梯度的话,可以计算一下什么时间流动相为100%甲醇,然后应该就可以大概知道什么时间出峰了。如果是台阶梯度就比较简单了,应该可以大概推算出峰时间的。感觉应该是没有问题的。如果不确认是不是已经出峰,可以单独进样Caryophllene oxide,考察一下。
2楼2009-08-06 09:12:21
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ddw888

金虫 (小有名气)

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clkk216(金币+1):谢谢参与
dandanxiong1983(金币+1,VIP+0): 8-6 16:02
dandanxiong1983(金币+1,VIP+0): 8-8 19:58
引用回帖:
Originally posted by dandanxiong1983 at 2009-8-6 09:05:
最近作课题遇到一个关于HPLC的一个很棘手的问题, 要同时测定香附中多个化合物的含量,总共六个化合物的同时测定,采用了梯度洗脱,但是其中脂溶性很大的化合物Caryophllene oxide(氧化石竹烯)怎么也洗不下来,但 ...

1.首先你如何判断未洗脱下来
2.梯度条件下对照品出峰在什么位置
3.有无Caryophllene oxide对照品,若没有你很难判断,可能要借助联用技术
3楼2009-08-06 09:55:26
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dandanxiong1983

金虫 (小有名气)

单独进样时,是可以出峰的。100%甲醇单独洗脱时5min就出来了,请问线性梯度怎么看的,包括计算方法又是怎样的?
4楼2009-08-06 10:22:26
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dandanxiong1983

金虫 (小有名气)

梯度条件下标准品也没有出峰,但是在100%甲醇洗脱时5min 就出峰了
5楼2009-08-06 10:25:16
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guangcai1980

至尊木虫 (正式写手)


dandanxiong1983(金币+1,VIP+0): 8-8 19:57
引用回帖:
Originally posted by dandanxiong1983 at 2009-8-6 10:22:
单独进样时,是可以出峰的。100%甲醇单独洗脱时5min就出来了,请问线性梯度怎么看的,包括计算方法又是怎样的?

就是看你的梯度洗脱程序表中甲醇的变化时间浓度曲线,就可以估计什么时间你的甲醇什么时间到达100%浓度啦!
6楼2009-08-06 11:10:54
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小药虫

金虫 (小有名气)

的确很奇怪,换用乙腈试试!
7楼2009-08-06 12:31:47
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cucupig

银虫 (小有名气)

氧化物一般极性还是挺大的呀,怎么会保留那么强呢?奇怪
8楼2009-08-06 13:28:59
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dandanxiong1983

金虫 (小有名气)

原因找到拉,和大家分享下,是因为加了酸的缘故,
9楼2009-08-06 16:01:03
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狼狼晴空

木虫 (著名写手)

梯度洗脱!先从极性大的开始!
10楼2009-08-08 17:01:34
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