应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 做过脂质体转染和流式的大佬帮帮忙
51/1返回列表
查看: 1383  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者等一个奇迹将赠送您 10 个金币

等一个奇迹

新虫 (初入文坛)

[求助] 做过脂质体转染和流式的大佬帮帮忙 已有1人参与

前辈同仁们，最近刚开始接触细胞的脂质体转染和流式，用lipo2000做了hela细胞的转染，空载质粒是pcDNA3.1加GFP标签的，48小时后做流式发现细胞早凋率上升了二三十倍，重复实验和单因素实验都做了，就是想不通为什么转染这个空载质粒会影响细胞凋亡，各位前辈有用过这种质粒的吗？有什么好的建议吗？

做过脂质体转染和流式的大佬帮帮忙


@gyesang 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-03-19 11:30:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
转染试剂就是会有点儿毒性，质粒里也会带些内毒素。
如果比较介意这个情况，可以使用无内毒素的质粒提取试剂盒和低毒性的转染试剂（比如TRANSIT-LT1）
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2021-03-19 12:35:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

等一个奇迹

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-03-19 12:35:31
转染试剂就是会有点儿毒性，质粒里也会带些内毒素。
如果比较介意这个情况，可以使用无内毒素的质粒提取试剂盒和低毒性的转染试剂（比如TRANSIT-LT1）

你好，我已经做过单因素实验，转染试剂和质粒对细胞的毒性很小，并且我用的就是去内毒素抽提的质粒，空载质粒的转染导致20%的早凋应该是不正常的吧

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2021-03-19 13:34:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
引用回帖:
3楼: Originally posted by 等一个奇迹 at 2021-03-19 13:34:11
你好，我已经做过单因素实验，转染试剂和质粒对细胞的毒性很小，并且我用的就是去内毒素抽提的质粒，空载质粒的转染导致20%的早凋应该是不正常的吧
...

转染试剂都会有一些毒性，只是有时候比较低看不出来而已。
可以检测一下支原体，有时候细胞虽然有支原体污染，但是平时养得好好的看形态和增殖速率也看不出问题。但是一旦有一些压力存在（比如转染），细胞自身的压力达到一定阈值，就会有凋亡。
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2021-03-19 14:15:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

等一个奇迹

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-03-19 14:15:50
转染试剂都会有一些毒性，只是有时候比较低看不出来而已。
可以检测一下支原体，有时候细胞虽然有支原体污染，但是平时养得好好的看形态和增殖速率也看不出问题。但是一旦有一些压力存在（比如转染），细胞自身的 ...

好的，我去做一下pcr 检测看看，先谢过

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2021-03-19 18:44:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 等一个奇迹 的主题更新
51/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +18 Lanmanbaby 2026-08-09 30/1500 2026-08-12 09:10 by xandria
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] FileCode能看出啥？ +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭