应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 做过脂质体转染和流式的大佬帮帮忙
51/1返回列表
查看: 1492  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者等一个奇迹将赠送您 10 个金币

等一个奇迹

新虫 (初入文坛)

[求助] 做过脂质体转染和流式的大佬帮帮忙 已有1人参与

前辈同仁们，最近刚开始接触细胞的脂质体转染和流式，用lipo2000做了hela细胞的转染，空载质粒是pcDNA3.1加GFP标签的，48小时后做流式发现细胞早凋率上升了二三十倍，重复实验和单因素实验都做了，就是想不通为什么转染这个空载质粒会影响细胞凋亡，各位前辈有用过这种质粒的吗？有什么好的建议吗？

做过脂质体转染和流式的大佬帮帮忙


@gyesang 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-03-19 11:30:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
转染试剂就是会有点儿毒性，质粒里也会带些内毒素。
如果比较介意这个情况，可以使用无内毒素的质粒提取试剂盒和低毒性的转染试剂（比如TRANSIT-LT1）
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2021-03-19 12:35:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

等一个奇迹

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-03-19 12:35:31
转染试剂就是会有点儿毒性，质粒里也会带些内毒素。
如果比较介意这个情况，可以使用无内毒素的质粒提取试剂盒和低毒性的转染试剂（比如TRANSIT-LT1）

你好，我已经做过单因素实验，转染试剂和质粒对细胞的毒性很小，并且我用的就是去内毒素抽提的质粒，空载质粒的转染导致20%的早凋应该是不正常的吧

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2021-03-19 13:34:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
引用回帖:
3楼: Originally posted by 等一个奇迹 at 2021-03-19 13:34:11
你好，我已经做过单因素实验，转染试剂和质粒对细胞的毒性很小，并且我用的就是去内毒素抽提的质粒，空载质粒的转染导致20%的早凋应该是不正常的吧
...

转染试剂都会有一些毒性，只是有时候比较低看不出来而已。
可以检测一下支原体，有时候细胞虽然有支原体污染，但是平时养得好好的看形态和增殖速率也看不出问题。但是一旦有一些压力存在（比如转染），细胞自身的压力达到一定阈值，就会有凋亡。
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2021-03-19 14:15:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

等一个奇迹

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-03-19 14:15:50
转染试剂都会有一些毒性，只是有时候比较低看不出来而已。
可以检测一下支原体，有时候细胞虽然有支原体污染，但是平时养得好好的看形态和增殖速率也看不出问题。但是一旦有一些压力存在（比如转染），细胞自身的 ...

好的，我去做一下pcr 检测看看，先谢过

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2021-03-19 18:44:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 等一个奇迹 的主题更新
51/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 15/750 2026-11-01 16:52 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 14/700 2026-11-01 16:45 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 22/1100 2026-11-01 16:35 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 14/700 2026-11-01 16:32 by BCdvBAEpt3zm
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 7/350 2026-11-01 15:08 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 7/350 2026-11-01 15:04 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 6/300 2026-11-01 15:01 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 9/450 2026-11-01 14:55 by BCdvBAEpt3zm
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 10/500 2026-11-01 14:50 by BCdvBAEpt3zm
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 8/400 2026-11-01 14:48 by BCdvBAEpt3zm
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 10/500 2026-11-01 14:35 by BCdvBAEpt3zm
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 14/700 2026-11-01 14:24 by BCdvBAEpt3zm
[硕博家园] 越来越担心硕士毕业后没有竞争力了 +9 zuesli 2026-10-27 15/750 2026-11-01 12:59 by Equinoxhua
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 8/400 2026-11-01 12:38 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 4/200 2026-11-01 12:38 by BCdvBAEpt3zm
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 11/550 2026-11-01 12:24 by BCdvBAEpt3zm
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 hKe7U1kad5Sg 2026-10-31 5/250 2026-11-01 11:14 by BCdvBAEpt3zm
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 4/200 2026-11-01 11:01 by BCdvBAEpt3zm
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 15/750 2026-11-01 05:22 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 申博自荐 2篇一区TOP+1篇EI+2公开发明专利 2027博士申请 +3 小小阿光 2026-10-27 3/150 2026-10-29 23:56 by 起风了的快乐
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭