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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 毕赤酵母组成型表达外源蛋白
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野山椒

铁虫 (小有名气)

[交流] 毕赤酵母组成型表达外源蛋白

用毕赤酵母GS115表达外源蛋白，为组成型表达，大概在96h左右OD涨到了300左右，还有继续生长的趋势，但是取上清检测酶活和蛋白质含量，和摇瓶是一样的，基本上相当于只长菌不表达，有什么可能的原因？有没有哪位大神遇到过类似的情况，交流一下，谢谢！
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那一股酸辣味！
1楼 2021-03-17 14:45:34
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Glorious47

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你用的什么启动子

发自小木虫IOS客户端
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5楼2021-05-18 13:38:40
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
野山椒: 金币+1, 谢谢 2021-03-17 17:13:21
你实验过程、诱导剂是什么、培养工艺怎么做的，都不知道，别人怎么给你提供建议。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2021-03-17 16:46:46
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野山椒

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wt3532 at 2021-03-17 16:46:46
你实验过程、诱导剂是什么、培养工艺怎么做的，都不知道，别人怎么给你提供建议。

不好意思，新手
我先挑取GS115单菌落到YPD上再接种到BMGY培养基上，长到一定浓度后按照接种量10%接种到发酵罐中，1.2L发酵罐，700毫升装液量，发酵培养基为BSM，初始pH控制在5，溶氧控制在20-50，初始搅拌速度300rpm，前期较高溶氧，OD涨到200多的时候溶氧控制在30左右，组成型表达，所以一直补加甘油，后期通过补加甘油速率和搅拌转速控制溶氧，最后OD涨到了400左右，但是检测上清蛋白含量和酶活都很低，和摇瓶差不多
所有很奇怪，实在想不出哪出了问题
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那一股酸辣味！
3楼2021-03-17 17:13:04
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匿名

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖仅楼主可见
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4楼2021-04-26 17:18:31
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