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zh1987hs

金虫 (著名写手)

分子模拟新手

[交流] 两相体系中的酶活检测

想请教下各位虫友:
      刚开始接触两相体系,即有机溶剂相和水相构成的生物催化体系,现在有个问题不明白:
     底物分布在有机相中,酶或微生物分布在水相中,是不是只有定时取点利用HPLC测定有机相的底物浓度才能做动力学呢?
     如果想用紫外或荧光测底物的变化有没有可能呢?有想过用NADH的吸光度变化来测,但是若放在石英皿中的溶液为两相的混合体系,测出来的变化还准吗?
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duanyongzhong

银虫 (正式写手)


zh1987hs(金币+1,VIP+0): 8-25 09:40
做动力学曲线方程一般不用底物的减少而是用产物的增加来反映酶催化反应的速度。脂肪酶催化的反应就是一个典型的两相体系,测定方法是把酶液加到底物的乳化液中来测定的,要形成均一的乳化液才好测定。仅供参考!
2楼2009-08-16 21:54:05
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yuxiang304

金虫 (著名写手)


zh1987hs(金币+1,VIP+0): 8-25 09:40
楼上说的有道理,一定要是均一的体系。当然要看你的二者乳化后是否对特征吸收波长有影响了,没有才可。 若有的话,建议换不同的溶剂(缓冲)试试。
3楼2009-08-23 10:09:25
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