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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 关于色谱柱
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ToSoul小明

新虫 (小有名气)

[交流] 关于色谱柱

各位，最近用10%FA处理血浆样品，没有蛋白沉淀，但是离心后仍然取上清复溶进样了，走了几十针样品，发现柱压升高了几倍，是不是柱子被蛋白堵住了

关于色谱柱


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1楼 2021-03-14 16:21:30
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zinfly

专家顾问 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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ToSoul小明: 金币+5 2021-03-24 10:42:38
真的是有钱啊。。。。蛋白不沉淀，至少是稀释一下吧，但愿你有保护柱，拆了换就好，毕竟300左右一个。
这样的一般低流速长时间冲，或者反冲，最好是咨询工程师。
ps，1.2w PSI还好，毕竟还有3k上升的空间。通常情况都是降速。
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2楼2021-03-16 14:29:37
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柳絮虫

新虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
ToSoul小明: 金币+3 2021-03-24 10:43:01
也不一定是柱子堵了，也许是系统堵了，最常见的是进样器堵了。热水洗系统试一试
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3楼2021-03-21 10:45:28
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zhangsea

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
甲酸加多了，反而沉淀效果不好
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4楼2021-04-14 20:52:14
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t892893235

木虫 (著名写手)

范德姆特大对勾
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
为什么不选择过滤后上机
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5楼2021-04-15 08:58:11
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琛琛：

新虫 (正式写手)
甲酸达到30%才有沉淀蛋白的效果，10%太少，如果不想加有机溶剂或提高甲酸含量，也可以试一下沉淀蛋白板

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6楼2021-04-16 08:18:17
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ToSoul小明

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 琛琛： at 2021-04-16 08:18:17
甲酸达到30%才有沉淀蛋白的效果，10%太少，如果不想加有机溶剂或提高甲酸含量，也可以试一下沉淀蛋白板

有机试剂和蛋白沉淀板的提取效果不是很理想，最后选用的10%TFA，不知道会不会影响仪器或者柱子

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7楼2021-04-19 13:57:53
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心在自在

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用乙腈、丙酮和三氟醋酸（0.1%）梯度洗脱能除去蛋白质污染
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HPLC/HPCE
8楼2021-04-27 15:48:23
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