应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 软琼脂克隆形成试验求助~~~~
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1175  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者Jenny01123将赠送您 10 个金币

Jenny01123

新虫 (初入文坛)

[求助] 软琼脂克隆形成试验求助~~~~ 已有1人参与

请问有哪位 大神做过软琼脂克隆形成试验呀，我根据步骤做了之后，养了有一个星期了，细胞没有任何变化，不知道自己哪里出问题了？实验室里也没有其他人做过，希望能和有经验的师兄师姐师弟师妹交流一下，不胜感激~~~
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2021-02-02 19:18:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先确定细胞是不是长起来了，一星期的话应该在显微镜下可以看到一簇一簇的细胞，一簇至少有五六个的样子。刚铺完的时候应该都是分散的一两个细胞。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

Jenny01123
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2021-02-03 11:41:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jenny01123

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-02-03 11:41:39
先确定细胞是不是长起来了，一星期的话应该在显微镜下可以看到一簇一簇的细胞，一簇至少有五六个的样子。刚铺完的时候应该都是分散的一两个细胞。

我现在看到的细胞还是单个的，是不是我在拿的时候得注意一点，要不然会散？
还有就是在晃动的时候上层也会随着培养基动，这是正常的吗？
另外在换液的时候枪头很容易把上层胶弄碎？上层胶我配的是0.7%的浓度，下层配的是1.2%的浓度。
请问你当时做的用的是什么牌子的琼脂啊？
问题有点多，希望不要介意~~·感谢感谢
赞一下 回复此楼
3楼2021-02-05 20:48:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
引用回帖:
3楼: Originally posted by Jenny01123 at 2021-02-05 20:48:29
我现在看到的细胞还是单个的，是不是我在拿的时候得注意一点，要不然会散？
还有就是在晃动的时候上层也会随着培养基动，这是正常的吗？
另外在换液的时候枪头很容易把上层胶弄碎？上层胶我配的是0.7%的浓度，下 ...

晃动的时候上层培养基会晃动是正常现象。换液的时候确实容易把最上层胶弄碎，不过一般不碍事，如果讲究的话可以在最上层的上面再铺一层不带细胞的软琼脂作为保护。
用的是Sigma的低熔点琼脂，A9045-10G。低熔点的软琼脂保证了当温度降到37度甚至更低的时候，软琼脂仍然可以保持液体状态一段时间。如果软琼脂没有降到足够温度就混合的话会把细胞烫死。
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2021-02-07 09:32:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Jenny01123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2021-02-07 09:32:45
晃动的时候上层培养基会晃动是正常现象。换液的时候确实容易把最上层胶弄碎，不过一般不碍事，如果讲究的话可以在最上层的上面再铺一层不带细胞的软琼脂作为保护。
用的是Sigma的低熔点琼脂，A9045-10G。低熔点的 ...

那上层不带细胞的那层配的时候得浓度应该是多少呢？和底层一样吗？
我刚查了一下你所用的好像是agarose，但是老师让我买的是agar，用的也是sigma的。虽然这两者不太一样，但感觉好像都能做。
你可以分享一下你当时做这个试验的protocol吗？如果不介意的话，这是我的邮箱或者你加我也行，1161780245@qq.com
另外我看到有些文献里的图拍出来的背景是白色的，是不是直接把图片颜色变成黑白的？不知道这个怎么弄
感谢大神的指导~~花花送给你
赞一下 回复此楼
5楼2021-02-07 15:12:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Jenny01123 的主题更新
51/1返回列表
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 271求调剂 +14 勒布朗@ 2026-03-31 19/950 2026-04-02 00:01 by 勒布朗@
[考研] 279求调剂 +3 学而思兮知 2026-04-01 3/150 2026-04-01 23:28 by 欣喜777
[考研] 292分，材料与化工，申请调剂 +18 程晴之 2026-04-01 20/1000 2026-04-01 23:01 by 来看流星雨10
[考研] 求调剂0703 +5 周嘉尧 2026-03-31 8/400 2026-04-01 20:32 by ltltkkk
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +15 柳溪边 2026-03-26 16/800 2026-04-01 17:07 by 七度不信任
[考研] 调剂推荐 +9 清酒714 2026-03-26 10/500 2026-04-01 16:25 by yanflower7133
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +10 hanamiko 2026-04-01 10/500 2026-04-01 15:14 by Wang200018
[考研] 材料专硕306英一数二 +7 z1z2z3879 2026-03-31 7/350 2026-04-01 14:50 by ZXlzxl0425
[考研] 一志愿郑大085600，310分求调剂 +6 李潇可 2026-03-26 6/300 2026-04-01 14:44 by chenqifeng666
[考研] 环境工程调剂 +9 hyzzzzzzz. 2026-04-01 9/450 2026-04-01 14:20 by salamander`
[考研] 086000调剂 +5 7901117076 2026-03-26 5/250 2026-03-31 17:45 by 544594351
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +6 hanamiko 2026-03-29 6/300 2026-03-31 16:35 by hypershenger
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等调剂 +8 哇呼哼呼哼 2026-03-27 10/500 2026-03-31 13:35 by Huaxue_Wang
[考研] 282求调剂 +3 呼吸都是减肥 2026-03-31 3/150 2026-03-31 10:00 by wangjy2002
[考研] 一志愿大连理工大学材料求调剂 +6 Gymno 2026-03-30 6/300 2026-03-31 07:26 by 无际的草原
[考研] 281求调剂 +5 亚克西good 2026-03-26 7/350 2026-03-30 20:42 by dophin1985
[考研] 332求调剂 +6 @MZB382400 2026-03-28 6/300 2026-03-30 16:57 by 无际的草原
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +6 niko- 2026-03-27 6/300 2026-03-30 10:25 by herarysara
[考研] 本科双非材料，跨考一志愿华电085801电气，283求调剂，任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭