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fyn512045

新虫 (初入文坛)

[交流] 克隆检测出现非特异性扩增是不是没有连接上,还是转化处了问题,请教!

克隆检测出现非特异性扩增是不是没有连接上,还是转化处了问题,请教!
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yangym1123

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
如果你的PCR没有得到单一的条带,即使回收也不会得到非常纯的目的条带,因而连接时就有可能将非目的基因条带连接到载体上,建议多挑取单克隆进行验证;一般目的片段较大,而非目的片段较小时会出现这样的问题。如果你的PCR得到了非常特异的单一条带,就可能是连接或转化时污染了其它东西!实验顺利哦!
5楼2009-07-28 20:18:53
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微笑漩涡

新虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个里面的问题很多,你要写出你详细的实验过程才好.
2楼2009-07-28 11:47:42
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kxjh

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
PCR的各个环节设置不好都有可能引起非特异扩增。
3楼2009-07-28 14:51:43
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695

木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
恩,每个环节都可能出问题,楼主还是仔细分析下为好,看是PCR还是连接,转化出了问题
4楼2009-07-28 16:39:00
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