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我想制备抗体,用于western Blot,将包涵体用8M的尿素溶解后,直接过Ni柱,用300mM的咪唑浓度洗脱出目的蛋白,跑电泳看出纯度较好,想请问各位前辈得到的目的蛋白必须得复性才能注射兔子吗?还有制备抗体前透析为除去去咪唑,尿素后,用什么溶解蛋白合适?没有尿素蛋白会不会又沉淀了,如果沉淀,可以直接用来乳化制备成抗原吗?
谢谢各位了!! |
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