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clean866

银虫 (初入文坛)

[交流] 包涵体抗体制备

我想制备抗体,用于western Blot,将包涵体用8M的尿素溶解后,直接过Ni柱,用300mM的咪唑浓度洗脱出目的蛋白,跑电泳看出纯度较好,想请问各位前辈得到的目的蛋白必须得复性才能注射兔子吗?还有制备抗体前透析为除去去咪唑,尿素后,用什么溶解蛋白合适?没有尿素蛋白会不会又沉淀了,如果沉淀,可以直接用来乳化制备成抗原吗?
谢谢各位了!!
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不用,可以直接制备抗体,但是对于活性蛋白,抗体的效价貌似有可能会降低,应该不会影响使用。
For my life!
2楼2009-07-27 14:30:59
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ly888lsp

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
对于活性蛋白,抗体的效价貌似有可能会降低
3楼2009-07-27 15:45:43
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clean866

银虫 (初入文坛)

恩,知道了,谢谢各位的指点!
4楼2009-07-27 16:09:14
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