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sunxm320

[交流] 大家利用pgem t easy vector连接的最大片段是多少?

大家利用pgem t easy vector连接的最大片段是多少?成功率怎么样?我需要做6百个克隆,300个是连接2.7k的pcr产物,300个是4k的?哪位高手指点一下!
还有购买的t载体中的control的片段长度是多少?问过promega的技术支持,说是3k,有点怀疑。
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695

木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我用的PGMET,现在连接的是2.2kb左右的
2楼2009-07-27 17:48:05
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gewu123

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我做过连接3.3和2.8kb的,估计4kb也没有问题。
3楼2009-07-28 01:36:14
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xhlxhl

木虫 (正式写手)

takara pmd19t


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
takara pmd19t  连接过4.5K的
4楼2009-07-28 03:02:00
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

肯定是越大越不好连接的,2.7K的肯定比4的连接好.你可以先用几个样品试试嘛,反正pgem t easy vector 是大家公认比较好的了.
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
5楼2009-07-28 13:52:05
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sunxm320

我现在已经连接上了十几个,但是大规模做的话还要考虑到效率的问题,现在想探寻一下大家提高成功率的的经验。
6楼2009-07-29 08:55:51
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xhlxhl

木虫 (正式写手)

TAKARA 的PMD 19T


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
TAKARA 的PMD 19T 连接过 4.5k的,挑了十个 ,测序8个阳性~· 效率还不错
7楼2009-08-27 18:34:30
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