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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 大家利用pgem t easy vector连接的最大片段是多少？
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sunxm320

[交流] 大家利用pgem t easy vector连接的最大片段是多少？

大家利用pgem t easy vector连接的最大片段是多少？成功率怎么样？我需要做6百个克隆，300个是连接2.7k的pcr产物，300个是4k的？哪位高手指点一下！
还有购买的t载体中的control的片段长度是多少？问过promega的技术支持，说是3k，有点怀疑。
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1楼 2009-07-27 13:44:22
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695

木虫 (职业作家)
★
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我用的PGMET，现在连接的是2.2kb左右的
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2楼2009-07-27 17:48:05
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gewu123

银虫 (小有名气)
★
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我做过连接3.3和2.8kb的，估计4kb也没有问题。
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3楼2009-07-28 01:36:14
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xhlxhl

木虫 (正式写手)

takara pmd19t

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
takara pmd19t  连接过4.5K的
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4楼2009-07-28 03:02:00
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
肯定是越大越不好连接的,2.7K的肯定比4的连接好.你可以先用几个样品试试嘛,反正pgem t easy vector 是大家公认比较好的了.
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
5楼2009-07-28 13:52:05
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sunxm320

我现在已经连接上了十几个，但是大规模做的话还要考虑到效率的问题，现在想探寻一下大家提高成功率的的经验。
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6楼2009-07-29 08:55:51
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xhlxhl

木虫 (正式写手)

TAKARA 的PMD 19T

★
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TAKARA 的PMD 19T 连接过 4.5k的，挑了十个 ，测序8个阳性~· 效率还不错
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7楼2009-08-27 18:34:30
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