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一只鱼ddtt

银虫 (小有名气)

[交流] 包涵体变性复性 已有5人参与

我现在在做镍柱亲和层析,小量纯化,但是目的带在包涵体中表达,我是先将包涵体变性,纯化后再复性,还是变性复性后再纯化呢?能告诉一些具体的方法吗?

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-4 at 15:17 ]
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做个有风度的人
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biohl

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个真得先考虑一下你要纯化蛋白的性质,既然你是做少量纯化,不考虑成本问题,那么通常先纯化再复性要好一些,另外最终复性液也不是一成不变的PBS,要根据蛋白质性质选择不同的buffer,pH,所加盐的种类以及浓度……
11楼2014-06-16 10:57:18
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2008207380

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
先在包涵体状态下纯化 然后在复性比较好吧
3楼2009-07-27 11:48:47
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rava

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我是先将包涵体变性,纯化后再复性。不能完全复性的话,复性后再纯化一次。
4楼2009-07-27 13:02:20
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一只鱼ddtt

银虫 (小有名气)

请问一下楼上的你做的结果怎么样啊!是小量纯化吗?一般收集多少菌体呀?
做个有风度的人
5楼2009-07-28 10:15:32
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