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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » pcR p不出目的基因
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xiangao

金虫 (正式写手)

[交流] pcR p不出目的基因

根据NCBI数据库的编码某蛋白的基因序列，设计引物，然后PCR 就是p不出目的基因   不知哪的问题     退火温度试过不同的   还是p不出    求助
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1楼 2009-07-26 21:22:38
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蓝皮鼠7983

至尊木虫 (文坛精英)

飞过蓝天
★
sxdxrhyy(金币+1,VIP+0):谢谢参与！ 7-27 10:11
看看是不是酶失活了,有时候公司的酶不怎么好
要么就是你的模板不纯
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海到尽头天做岸，山登绝顶我为峰。
2楼2009-07-27 00:11:29
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xiangao

金虫 (正式写手)
模板应该没问题   我NCBI查的是同一种菌，但与我手头的菌是不同的菌种编号。难道基因序列二者不一样吗？

[ Last edited by xiangao on 2009-7-27 at 00:25 ]
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3楼2009-07-27 00:22:26
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艾嘉

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
多查几种编号的基因序列，用程序比对下就知道是不是模板的差异。
还有dNTP的冻融次数及用量也很重要
当然，最重要的应该是引物吧
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4楼2009-07-27 01:54:30
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317724144

新虫 (初入文坛)
是不是引物的问题？
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人活着就要呼吸：呼，就是出那口气；吸，就是出那口气……
5楼2009-07-27 15:39:53
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syn1985

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
换换引物吧 或者兼并引物 不同的编号基因可能会有差异的
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6楼2009-07-27 16:09:06
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zhuangqli

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
很可能就是你设计的引物的问题
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7楼2009-07-27 16:17:28
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ly888lsp

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是酶失活了
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8楼2009-07-27 16:38:50
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第十一维

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
没有目的基因啊，有没有期待的条带啊，如果有就是你的引物问题了，如果什么都没有，那可能引物有问题，或者条件没有找好，做个温度梯度试一下
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讲学习进行到底
9楼2009-07-27 16:43:27
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695

木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可能是引物的问题了，祝你早日解决
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10楼2009-07-27 17:40:58
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