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xiangao

金虫 (正式写手)

[交流] pcR p不出目的基因

根据NCBI数据库的编码某蛋白的基因序列,设计引物,然后PCR 就是p不出目的基因   不知哪的问题     退火温度试过不同的   还是p不出    求助
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蓝皮鼠7983

至尊木虫 (文坛精英)

飞过蓝天


sxdxrhyy(金币+1,VIP+0):谢谢参与! 7-27 10:11
看看是不是酶失活了,有时候公司的酶不怎么好
要么就是你的模板不纯
海到尽头天做岸,山登绝顶我为峰。
2楼2009-07-27 00:11:29
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xiangao

金虫 (正式写手)

模板应该没问题   我NCBI查的是同一种菌,但与我手头的菌是不同的菌种编号。难道基因序列二者不一样吗?

[ Last edited by xiangao on 2009-7-27 at 00:25 ]
3楼2009-07-27 00:22:26
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艾嘉


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
多查几种编号的基因序列,用程序比对下就知道是不是模板的差异。
还有dNTP的冻融次数及用量也很重要
当然,最重要的应该是引物吧
4楼2009-07-27 01:54:30
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317724144

新虫 (初入文坛)

是不是引物的问题?
人活着就要呼吸:呼,就是出那口气;吸,就是出那口气……
5楼2009-07-27 15:39:53
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syn1985

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
换换引物吧 或者兼并引物 不同的编号基因可能会有差异的
6楼2009-07-27 16:09:06
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zhuangqli

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
很可能就是你设计的引物的问题
7楼2009-07-27 16:17:28
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ly888lsp

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是不是酶失活了
8楼2009-07-27 16:38:50
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第十一维

新虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没有目的基因啊,有没有期待的条带啊,如果有就是你的引物问题了,如果什么都没有,那可能引物有问题,或者条件没有找好,做个温度梯度试一下
讲学习进行到底
9楼2009-07-27 16:43:27
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695

木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
可能是引物的问题了,祝你早日解决
10楼2009-07-27 17:40:58
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