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【求助】LC-MS 求助
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问一个菜鸟问题，请牛人们解答,万分感谢 用LC-MS 测药物在血浆中的含量时，我用一个standard来测试已知浓度的血浆样品. standard的配制方法是： CH3CN+药品+沉淀剂，分离后加内标 已知浓度样品的配制方法是： plasma +药品+沉淀剂，分离后加内标 请问能用这个standard来测试plasma中药品的浓度吗？ 如果我用另外一个standard( H2O + 药品+沉淀剂）来测，就得到不同的recovery了。我该用哪个作为standard呢？ |
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longquan8297
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2楼2009-07-26 08:49:08
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solocheng
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5楼2009-08-04 12:58:20
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iamwolfling(金币+5,VIP+0):谢谢！你的回答简直就是paper提纲 8-8 09:31
iamwolfling(金币+5,VIP+0):谢谢！你的回答简直就是paper提纲 8-8 09:31
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同意yaoji0501 ,Fiona.xxt ,觉得solocheng理解不对，不象是用ACN提取的，如果那样的确已知浓度样品也需要用ACN提取。 calibration curve的配制方法是： 空白plasma(或者模拟plasma的BUFFER,或H2O)+不同浓度药品+沉淀剂，提取分离后氮气吹干，reconstitution,进样前加适宜浓度内标（如果是非同位素内标，否则和药物一起加入） 用于测回收率已知浓度样品的配制方法是： 空白plasma +高中低3个浓度药品+沉淀剂，提取分离后氮气吹干，reconstitution,进样前加适宜浓度内标（如果是非同位素内标，否则和药物一起加入） calibration curve配制以空白plasma为佳，这样会计算出相对回收率，也就是将matrix effect校正以后的回收率。 [ Last edited by ahugecat on 2009-8-5 at 00:44 ] |
6楼2009-08-05 00:34:07
solocheng
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ahugecat 似乎跑题了。 请问不是用ACN是用什么提的呢？ plasma本来就是水溶液，难道还要加水来提么？ 虽然目前文献有报道，plasma是可以直接进HPLC，可是这种柱子是非常特殊的，而且价格也很昂贵。当然，如果你要进MS,这种方法还是要商榷的，毕竟ms的灵敏度更高了，不处理，matrix 造成的mass back 的影响也会更大。 至于进ms的样品前，最后recongstitution除了用ACN外（当然其他适合的organic solvent 也是可以的），还可以用ACN＋H2O （1：1或其他比例，根据你的实验。如果是hot的样品，就直接可以用LSC来counting，取dpm值最大的溶液进行提取，所以在做real 样品前，一定要用空白的，一般是pre－dose的plasma，spike 进去compound进行小试， 毕竟plasma对于做代谢的来说是万不可随意浪费）。 对于定量，你的标准品溶液只有和最终进ms的样品溶液所用的溶剂相同，才可以算是平行实验，这样对于mass back 的影响才是一致的，你的定量才是有效的。 至于什么加样回收， 那都是后话，含量都测不准，加样回收 也就没什么必要了。 一点拙见，还望赐教。 [ Last edited by solocheng on 2009-8-5 at 09:30 ] |
7楼2009-08-05 09:28:20
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8楼2009-08-05 09:31:23
solocheng
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9楼2009-08-05 09:51:51