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蛋白纯化析出
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| 蛋白等电点为7.22,我用的缓冲液是磷酸缓冲液,pH为8.0,500mM的NaCl,500mM的咪唑,镍柱纯化蛋白,蛋白被洗下来以后,冰上放置,会随时间的增加,析出越多,2个小时就有沉淀生成,蛋白浓度在3mg/ml左右,后来在缓冲液中加了2mM的β-巯基乙醇,一样析出,离心取上清,我分别用离子浓度为150mM和400mM的透析液透析过夜,一样是析出,跪求大佬,这种情况应该考虑什么因素?谢谢 |
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