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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » SOD酶活测定
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侯瘦瘦啊

银虫 (小有名气)

[求助] SOD酶活测定 已有1人参与

用生物信息的方法突变了SOD酶的一些位点，后续需要实验验证是否提升了酶活，  看文献中使用邻苯三酚自氧法测定都是分光光度计，是否能用酶标仪呢？求教求教。
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1楼 2020-11-30 16:52:36
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青丝雕流年

新虫 (小有名气)
用酶标仪 96孔板用新的 做好对照 排除下干扰 数据还是比较可信的

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5楼2022-05-10 15:05:05
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
侯瘦瘦啊: 金币+1 2020-11-30 21:42:18
可以用酶标仪，但是酶标仪必须配有325nm附近波长的滤光片或者配有光栅单色器可以测325nm。另外，有的塑料在这个波长范围有吸收，必须保证使用的96孔板的材质在这个范围内没有吸收。
紫外可见分光光度计灵敏度更好，而且一般使用石英比色皿（不是塑料或普通玻璃），所以没有这方面问题。
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2020-11-30 17:51:59
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侯瘦瘦啊

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2020-11-30 07:51:59
可以用酶标仪，但是酶标仪必须配有325nm附近波长的滤光片或者配有光栅单色器可以测325nm。另外，有的塑料在这个波长范围有吸收，必须保证使用的96孔板的材质在这个范围内没有吸收。
紫外可见分光光度计灵敏度更好， ...

我的数据量有点大，所以想用酶标仪。那塑料的96孔板有不吸收的吗？我看都是要用石英材质的。但是很贵。
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3楼2020-11-30 21:44:22
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 侯瘦瘦啊 at 2020-11-30 21:44:22
我的数据量有点大，所以想用酶标仪。那塑料的96孔板有不吸收的吗？我看都是要用石英材质的。但是很贵。...

大部分聚苯乙烯的96孔板在350nm波长以下都有些吸收。但是如果吸收值比较小，你的信号变化又足够强的话，把背景扣掉就可以了。
测量时候也可以用其他波长的做近似处理，往往也能获得较好的线性。
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2020-12-01 15:12:18
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