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wanghao44

铁虫 (正式写手)

[求助] 蛋白质负染答疑

以下摘自文献中的一段话“负染技术使用重金属盐作为染色剂,比如甲酸铀或者醋酸双氧铀。首先让重金属盐覆盖并渗透到生物大分子中去,然后把样品晾干脱水,蛋白质在这个干燥的过程中可能已经分解或者破坏掉了,但干燥后的盐保持了生物大分子在干燥前的外部轮廓。这个过程有点像铸造时制作沙模的过程,重金属盐就是沙子。当用电镜观察时,人们看到的生物大分子的图像其实是蛋白降解后留下的空洞,因此衬度是反转的,所以称为负染。”
    照理来说,重金属的散射能力要比蛋白质本身强很多,那么,沉积在蛋白质表面的重金属,应该会导致蛋白质本身的散射能力增强,从而使其图像变得更暗一些,那为什么实际衬度会有所反转,即图像变得更亮一些呢?
    还有,覆盖了重金属的蛋白质接着干燥脱水,实际干燥只要1-2分钟即可,在这么短的时间下,蛋白质就会被降解?就算被降解了,蛋白质的外部轮廓被重金属所替代,不应该是图像加深么?为什么实际情况会变浅呢?希望虫友能解开我的疑惑,感谢
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