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蛋白质负染答疑
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以下摘自文献中的一段话“负染技术使用重金属盐作为染色剂，比如甲酸铀或者醋酸双氧铀。首先让重金属盐覆盖并渗透到生物大分子中去，然后把样品晾干脱水，蛋白质在这个干燥的过程中可能已经分解或者破坏掉了，但干燥后的盐保持了生物大分子在干燥前的外部轮廓。这个过程有点像铸造时制作沙模的过程，重金属盐就是沙子。当用电镜观察时，人们看到的生物大分子的图像其实是蛋白降解后留下的空洞，因此衬度是反转的，所以称为负染。” 照理来说，重金属的散射能力要比蛋白质本身强很多，那么，沉积在蛋白质表面的重金属，应该会导致蛋白质本身的散射能力增强，从而使其图像变得更暗一些，那为什么实际衬度会有所反转，即图像变得更亮一些呢？ 还有，覆盖了重金属的蛋白质接着干燥脱水，实际干燥只要1-2分钟即可，在这么短的时间下，蛋白质就会被降解？就算被降解了，蛋白质的外部轮廓被重金属所替代，不应该是图像加深么？为什么实际情况会变浅呢？希望虫友能解开我的疑惑，感谢 |
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