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hihoney(金币+1,VIP+0):多谢关注。发个关注奖。 8-3 09:00
11楼2009-07-28 19:11:24
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恒星年

银虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
hihoney(金币+1,VIP+0):我的片段也很小,正在用这种方法。 我用的方法是 只加一种引物,不知是否可行。欢迎有经验的您向我授渔。我的邮箱sooooongh@gmail.com . 8-3 09:18
用不对称PCR,不过我们当时做的片段的大小比较小,相信大一点的片段也可以
12楼2009-07-28 20:31:14
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shensc727

金虫 (小有名气)

学习了!
13楼2009-07-28 20:56:32
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greatsaint

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用M13,f1等都可以得到单链DNA。但是没做过,不知道具体如何操作。
14楼2009-07-28 21:12:56
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hyde0706

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 2008207380 at 2009-7-28 11:59:
提rna 再反转成cDNA也行的吧

其实成本还可以,主要是看实验次数了,如果只作一次成本肯定比较高,毕竟一个生物素修饰的引物就要200多。
15楼2009-07-29 16:54:22
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hyde0706

木虫 (正式写手)

不好意思,引用错了。
16楼2009-07-29 16:54:53
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)


引用回帖:
Originally posted by 恒星年 at 2009-7-28 20:31:
用不对称PCR,不过我们当时做的片段的大小比较小,相信大一点的片段也可以

我也在做,可是怎么区分 哪个是单链,回收哪个片段?

请指教。
17楼2009-07-30 19:39:30
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duannuo

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
也可以通过温度变化吧,94度变性10min,冰浴10min
18楼2009-08-02 21:24:35
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)


引用回帖:
Originally posted by duannuo at 2009-8-2 21:24:
也可以通过温度变化吧,94度变性10min,冰浴10min

但是这样无法排除其中的双链DNA。
19楼2009-08-02 21:50:50
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smallcat227

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
hihoney(金币+1,VIP+0):我只加一种引物扩,得到的片段都比 用双引物 扩出来的 片段大一些。 8-3 09:28
引用回帖:
Originally posted by hihoney at 2009-7-30 19:39:



我也在做,可是怎么区分 哪个是单链,回收哪个片段?

请指教。

对照mark,原来一半的就是,比如你片段2000bp,大概1000左右的就是单链
20楼2009-08-02 23:58:23
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