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mochenmi

铜虫 (小有名气)

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[求助] 核糖体功能相关基因以及内参蛋白的疑惑已有1人参与

请教各位大神，我研究的基因敲除后导致细胞内核糖体异常，细胞整体蛋白翻译过程受阻。
现在想证明突变体比野生型细胞内总蛋白含量减少，所以打算提取等量组织的总蛋白，有个困惑是内参蛋白如何选择，因为内参蛋白也是核糖体合成的。如何选择内参蛋白证明我提取的组织量是一致的呢？
或者有别的试验能够证明核糖体相关功能受阻呢？

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1楼 2020-10-29 23:53:33

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fuyuandj86

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引用回帖:

3楼: Originally posted by mochenmi at 2020-10-31 01:18:49
谢谢回复，现在的问题是突变体总蛋白含量就比野生型减少，并不是某一个蛋白含量减少。
举个例子，我同样裂解1g样品，严格采用相同步骤，突变体获得的总蛋白含量只有野生型的1/3，如何让别人相信这个结果，而不怀疑 ...

总蛋白一样的情况下，用放射性同位素标记或荧光检测单位时间内新合成的蛋白，可以证明翻译速率变慢