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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 核糖体功能相关基因以及内参蛋白的疑惑
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mochenmi

铜虫 (小有名气)

[求助] 核糖体功能相关基因以及内参蛋白的疑惑 已有1人参与

请教各位大神，我研究的基因敲除后导致细胞内核糖体异常，细胞整体蛋白翻译过程受阻。
现在想证明突变体比野生型细胞内总蛋白含量减少，所以打算提取等量组织的总蛋白，有个困惑是内参蛋白如何选择，因为内参蛋白也是核糖体合成的。如何选择内参蛋白证明我提取的组织量是一致的呢？
或者有别的试验能够证明核糖体相关功能受阻呢？
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1楼 2020-10-29 23:53:33
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以放一个立春红染WB膜的图片证明总蛋白量一样。
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2020-10-30 10:17:22
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mochenmi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2020-10-30 10:17:22
可以放一个立春红染WB膜的图片证明总蛋白量一样。

谢谢回复，现在的问题是突变体总蛋白含量就比野生型减少，并不是某一个蛋白含量减少。
举个例子，我同样裂解1g样品，严格采用相同步骤，突变体获得的总蛋白含量只有野生型的1/3，如何让别人相信这个结果，而不怀疑是人为因素？

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3楼2020-10-31 14:18:49
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人
引用回帖:
3楼: Originally posted by mochenmi at 2020-10-31 01:18:49
谢谢回复，现在的问题是突变体总蛋白含量就比野生型减少，并不是某一个蛋白含量减少。
举个例子，我同样裂解1g样品，严格采用相同步骤，突变体获得的总蛋白含量只有野生型的1/3，如何让别人相信这个结果，而不怀疑 ...

总蛋白一样的情况下，用放射性同位素标记或荧光检测单位时间内新合成的蛋白，可以证明翻译速率变慢
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
4楼2020-10-31 15:04:43
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mochenmi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2020-10-31 15:04:43
总蛋白一样的情况下，用放射性同位素标记或荧光检测单位时间内新合成的蛋白，可以证明翻译速率变慢...

好办法

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5楼2020-10-31 17:31:00
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