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帕戴维

新虫 (小有名气)

[求助] 抗性筛选

基因敲除，对野生型真菌做抗性筛选，用的潮霉素，几次重复后发现其耐受浓度不一致。偶尔一次做到100ug/ml还能生长，但比低浓度条件下长得差。这样的不确定结果，可能是真菌本身的问题么？另外，文献对其他真菌用到筛选浓度最高达200ug/ml，如果有必要可能会做到这个浓度。
期待大家的交流探讨！！@biostar2009
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1楼 2020-10-29 23:45:22
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
换诺尔丝霉素吧，真菌耐受潮霉素不稳定，

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2楼2020-10-30 11:34:23
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帕戴维

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2020-10-30 11:34:23
换诺尔丝霉素吧，真菌耐受潮霉素不稳定，

谢谢建议。只是看文献也用的挺好的，潮霉素属于氨基糖苷类应该蛮稳定的呀，倒板温度也是温热时加入抗生素的。

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3楼2020-10-30 17:04:06
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帕戴维

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2020-10-30 11:34:23
换诺尔丝霉素吧，真菌耐受潮霉素不稳定，

现在野生型太耐受了，转化后的板子都满板长，根本挑不出转化子了。

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4楼2020-10-30 17:05:26
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)
就是说，酵母对潮霉素的耐受范围很大，用起来很不稳定，

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5楼2020-10-30 21:09:13
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帕戴维

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by biosci at 2020-10-30 21:09:13
就是说，酵母对潮霉素的耐受范围很大，用起来很不稳定，

好的，谢谢建议。换抗性那得重构质粒了

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6楼2020-10-30 23:07:38
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