应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 网络生活区 » 有奖问答 » 实验讨论 » 验证提取的RNA中是否含有DNA残留-引物设计
51/1返回列表
查看: 1487  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【悬赏金币】回答本帖问题，作者uu910109将赠送您 20 个金币
本帖产生 1 个 博学EPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

uu910109

银虫 (小有名气)

[求助] 验证提取的RNA中是否含有DNA残留-引物设计

实验介绍：
想设计引物来确定提取的RNA中是否含有DNA残留，引物5、6、7为正向引物在外显子上，反向引物在内含子上，预期想达到无论是在实验的哪个阶段（RNA、cDNA、或者文库），均能检测提取的RNA中是否含有DNA。
设计引物后进行验证：RNA、BC DNA、NTC均进行逆转录操作，然后使用设计的引物进行扩增，但是RNA的逆转录产物cDNA也扩增出了条带，且条带大小和DNA扩增的产物一致，请问各位大神问题出在了哪里呀？

验证提取的RNA中是否含有DNA残留-引物设计
微信图片_20201012174736.png
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2020-10-12 18:00:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

uu910109

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by glowinthesky at 2020-10-14 16:36:57
说明你提的RNA里面有DNA残留，反转录之后仍然有残留？
你用DNase消化一下做个阴性对照试试

后续我们直接用RNA模板（没有逆转录）直接进行扩增，发现并没有明显条带，可以确定并不是DNA残留造成的，我怀疑会不会有mRNA前体的存在，决定去测一个一代看一下序列。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2020-10-15 10:44:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

glowinthesky

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
uu910109: 金币+30, 博学EPI+1, ★有帮助 2020-10-15 10:45:05
说明你提的RNA里面有DNA残留，反转录之后仍然有残留？
你用DNase消化一下做个阴性对照试试
赞一下 回复此楼
2楼2020-10-14 16:36:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答
不应助 确定回帖应助 (注意：应助才可能被奖励，但不允许灌水，必须填写15个字符以上)
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 FlhJF7cq3uT3 2026-10-04 9/450 2026-10-07 11:21 by EXuX9l7TjjIY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 FlhJF7cq3uT3 2026-10-04 8/400 2026-10-07 11:11 by EXuX9l7TjjIY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 FlhJF7cq3uT3 2026-10-04 9/450 2026-10-07 11:07 by EXuX9l7TjjIY
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 FlhJF7cq3uT3 2026-10-04 8/400 2026-10-07 11:01 by EXuX9l7TjjIY
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 FlhJF7cq3uT3 2026-10-04 7/350 2026-10-07 10:51 by EXuX9l7TjjIY
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 FlhJF7cq3uT3 2026-10-04 10/500 2026-10-07 10:49 by EXuX9l7TjjIY
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 FlhJF7cq3uT3 2026-10-04 11/550 2026-10-07 10:29 by EXuX9l7TjjIY
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 FlhJF7cq3uT3 2026-10-04 8/400 2026-10-07 10:21 by EXuX9l7TjjIY
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 FlhJF7cq3uT3 2026-10-04 9/450 2026-10-07 10:11 by EXuX9l7TjjIY
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 FlhJF7cq3uT3 2026-10-04 13/650 2026-10-07 10:09 by EXuX9l7TjjIY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 FlhJF7cq3uT3 2026-10-04 7/350 2026-10-07 10:07 by EXuX9l7TjjIY
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 FUSxPqiIHRjH 2026-10-04 10/500 2026-10-07 10:01 by EXuX9l7TjjIY
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 FUSxPqiIHRjH 2026-10-04 11/550 2026-10-07 09:51 by EXuX9l7TjjIY
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 FUSxPqiIHRjH 2026-10-04 12/600 2026-10-07 09:49 by EXuX9l7TjjIY
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 FUSxPqiIHRjH 2026-10-04 12/600 2026-10-07 09:49 by EXuX9l7TjjIY
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 FUSxPqiIHRjH 2026-10-04 9/450 2026-10-06 14:28 by x7yLzftaCUEL
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 FUSxPqiIHRjH 2026-10-04 12/600 2026-10-06 14:26 by x7yLzftaCUEL
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 FlhJF7cq3uT3 2026-10-05 4/200 2026-10-06 05:08 by z1aZaKkVi71s
[教师之家] 烦躁 +5 水冰月月野兔 2026-10-03 5/250 2026-10-05 21:59 by 火星超人xi
[教师之家] 寻找合作团队 +4 悠悠2003 2026-10-01 4/200 2026-10-04 15:18 by Zh_fish
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭