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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 关于siRNA沉默GFP
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小菜鸡v

新虫 (正式写手)

[求助] 关于siRNA沉默GFP 已有1人参与

1、我现在有转染了GFP的U118细胞，我想要购买siRNA来沉默GFP，请问下大佬是不是所有gfp都是一样的蛋白吗？我只要购买一种siRNA就能沉默gfp

2、我是将购买的siRNA负载在我合成的材料上来进行转染，在这个过程中需要注意什么呢

3、请问有做过相似实验的大佬吗，寻求帮助

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1楼 2020-10-09 10:06:26
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BioChen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1. 常用的GFP是eGFP，e表示增强，还有各种对它的修改，不过只有几个氨基酸的差别，你可以认为GFP都是一样蛋白。你查文献，得到siRNA的序列，交给公司合成，便宜一些，也可以直接买eGFP siRNA。

2. 转染试剂用得多是阳离子脂质体或者阳离子聚合物，转染步骤参考商业化产品的说明书。转染RNA注意每一步都是RNase free的。转染时，要摸索浓度，转染试剂是对细胞有毒性的。
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2楼2020-10-12 10:52:20
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