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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请教用过PCR引物和探针的达人，现在国产的质量如何？
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SteveNash

至尊木虫 (职业作家)

[求助] 请教用过PCR引物和探针的达人，现在国产的质量如何？ 已有1人参与

现在国内有很多的DNA合成公司，如金斯瑞、上海生工、金唯智等。我搜到了一些前些年的评论，2010年前反馈的信息中因为引物的问题导致的PCR失败发生的事情还不少，不知道现在国产的质量水平提高了吗？因为PCR引物问题导致的实验失败事件概率怎么样？

想请教用过PCR引物和探针的达人，现在这些国产的PCR引物和探针质量水平如何，纯度和碱基缺失率都怎么样，实际交付的产品能达到国标的水准吗？国产的里面哪家质量比较好？跟进口的相比有多大差距？

另外，在收到产品后，你们会自己再做一下质检吗？如果做的话会用哪些方法？
请达人赐教！
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1楼 2020-09-22 10:55:24
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雨独步

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by SteveNash at 2020-09-23 12:00:05
感谢应助！另外还想求教一下简并引物偏好性太强是指什么问题。现在国产的引物价格一般都是多少？还有您是否用过探针，探针的质量要求跟PCR引物有不同吗？或者说在购买探针的时候有哪些方面需要注意。...

简并引物是指引物中有N（A+T+C+G）、S（G+C）等碱基，目的是对该位点进行饱和突变，偏好性强是随机挑取单克隆测序时，多个测序结果完全相同。现在引物一般是0.4元/bp，只用最基础的纯化方式。我没有用过探针，但是探针要求的纯化方式好像比较高。具体的注意事项可以请教用过的朋友或者引物合成公司，他们可以给出一些建议。
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4楼2020-09-23 17:20:59
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雨独步

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与，应助指数 +1
SteveNash: 金币+50, ★★★很有帮助 2020-09-23 11:55:46
SteveNash: 金币+50, ★★★很有帮助 2020-09-24 08:48:43
很早的时候用Invitrogen的引物，近些年都是用的国产，像捷瑞、泓迅等。就是常规PCR，会更考虑价格和送货速度，总体来说能够满足实验需求，偶尔会出现碱基缺失，或者简并引物偏好性太强等问题。订制引物时可以自己选择纯化方式，当然要求越高，收费越高。我们只用最基础的纯化方式，收到产品直接就用了，没做过质检。
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2楼2020-09-22 16:24:45
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SteveNash

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 雨独步 at 2020-09-22 16:24:45
很早的时候用Invitrogen的引物，近些年都是用的国产，像捷瑞、泓迅等。就是常规PCR，会更考虑价格和送货速度，总体来说能够满足实验需求，偶尔会出现碱基缺失，或者简并引物偏好性太强等问题。订制引物时可以自己选 ...

感谢应助！另外还想求教一下简并引物偏好性太强是指什么问题。现在国产的引物价格一般都是多少？还有您是否用过探针，探针的质量要求跟PCR引物有不同吗？或者说在购买探针的时候有哪些方面需要注意。
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3楼2020-09-23 12:00:05
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