24小时热门版块排行榜    

查看: 1210  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

SteveNash

至尊木虫 (职业作家)

[求助] 请教用过PCR引物和探针的达人,现在国产的质量如何? 已有1人参与

现在国内有很多的DNA合成公司,如金斯瑞、上海生工、金唯智等。我搜到了一些前些年的评论,2010年前反馈的信息中因为引物的问题导致的PCR失败发生的事情还不少,不知道现在国产的质量水平提高了吗?因为PCR引物问题导致的实验失败事件概率怎么样?

想请教用过PCR引物和探针的达人,现在这些国产的PCR引物和探针质量水平如何,纯度和碱基缺失率都怎么样,实际交付的产品能达到国标的水准吗?国产的里面哪家质量比较好?跟进口的相比有多大差距?

另外,在收到产品后,你们会自己再做一下质检吗?如果做的话会用哪些方法?
请达人赐教!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

SteveNash

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 雨独步 at 2020-09-22 16:24:45
很早的时候用Invitrogen的引物,近些年都是用的国产,像捷瑞、泓迅等。就是常规PCR,会更考虑价格和送货速度,总体来说能够满足实验需求,偶尔会出现碱基缺失,或者简并引物偏好性太强等问题。订制引物时可以自己选 ...

感谢应助!另外还想求教一下简并引物偏好性太强是指什么问题。现在国产的引物价格一般都是多少?还有您是否用过探针,探针的质量要求跟PCR引物有不同吗?或者说在购买探针的时候有哪些方面需要注意。
3楼2020-09-23 12:00:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

雨独步

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ...
感谢参与,应助指数 +1
SteveNash: 金币+50, ★★★很有帮助 2020-09-23 11:55:46
SteveNash: 金币+50, ★★★很有帮助 2020-09-24 08:48:43
很早的时候用Invitrogen的引物,近些年都是用的国产,像捷瑞、泓迅等。就是常规PCR,会更考虑价格和送货速度,总体来说能够满足实验需求,偶尔会出现碱基缺失,或者简并引物偏好性太强等问题。订制引物时可以自己选择纯化方式,当然要求越高,收费越高。我们只用最基础的纯化方式,收到产品直接就用了,没做过质检。
2楼2020-09-22 16:24:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨独步

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by SteveNash at 2020-09-23 12:00:05
感谢应助!另外还想求教一下简并引物偏好性太强是指什么问题。现在国产的引物价格一般都是多少?还有您是否用过探针,探针的质量要求跟PCR引物有不同吗?或者说在购买探针的时候有哪些方面需要注意。...

简并引物是指引物中有N(A+T+C+G)、S(G+C)等碱基,目的是对该位点进行饱和突变,偏好性强是随机挑取单克隆测序时,多个测序结果完全相同。现在引物一般是0.4元/bp,只用最基础的纯化方式。我没有用过探针,但是探针要求的纯化方式好像比较高。具体的注意事项可以请教用过的朋友或者引物合成公司,他们可以给出一些建议。
4楼2020-09-23 17:20:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +37 医学老男孩 2026-08-13 87/4350 2026-08-18 06:35 by 医学老男孩
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +4 基诺咪客 2026-08-17 4/200 2026-08-17 16:10 by Vivilian
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
请填处理意见