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碱裂解后内源性核酸酶会降解质粒吗？ 已有2人参与
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质粒稳定性相关文献中提到“The usual procedure to avoid pDNA degradation by endogenous bacterial nucleases is to go ahead promptly with alkaline lysis”,《分子克隆》中介绍碱裂解法时也提到“从细胞中释放DNA，去除与DNA结合的蛋白质并快速使胞内核酸酶失活”。 以上资料都认为，碱裂解后需要避免内源性核酸酶对质粒的降解。而我的问题是，大肠杆菌中的质粒DNA不是会被甲基化修饰从而避免被内源性核酸酶降解吗？因此，裂解后应该并不需要担心质粒被内源性核酸酶降解啊，而且如果质粒会被内源性核酸酶降解，那么裂解之前在大肠杆菌体内岂不早就被降解光了么？ 十分期待各位虫友的指导解惑，谢谢！ |
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