24小时热门版块排行榜    

查看: 1261  |  回复: 4
【悬赏金币】回答本帖问题,作者ap372767129将赠送您 100 个金币

ap372767129

铁虫 (正式写手)

[求助] 大肠杆菌发酵的问题 已有1人参与

各位老师同学们好,我现在实验遇到了些麻烦。就是使用大肠杆菌BL21在25℃发酵表达一种蛋白酶(长时间发酵,要发酵液中的酶),发酵70h后发现发酵液中总是出现跟毛线团一样的聚集物,好像什么东西没溶解。重新转化感受态之后再表达依然是这种情况。但是转化其他表达载体后发酵就没有这样的现象。应该可以排除是培养基的问题和菌被污染问题,这个聚集物是酶的包涵体吗还是什么。另:测的酶活也很低,请老师不吝解答。

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forhighbio

捐助贵宾 (著名写手)


是分泌的出来的酶,还是胞内重组表达

发自小木虫Android客户端
2楼2020-09-06 09:48:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ap372767129

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by forhighbio at 2020-09-06 09:48:40
是分泌的出来的酶,还是胞内重组表达

载体上有信号肽,分泌到细胞外

发自小木虫Android客户端
3楼2020-09-06 12:18:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forhighbio

捐助贵宾 (著名写手)


4楼2020-09-06 21:41:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a336688

木虫 (小有名气)

追梦

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
周期过长,蛋白部分变性,会有絮状沉淀析出。建议改变发酵工艺,摸索最佳工艺。
5楼2020-09-07 09:16:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ap372767129 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +6 启萌科技 2026-08-12 21/1050 2026-08-14 19:48 by 启萌科技
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +22 医学老男孩 2026-08-13 48/2400 2026-08-14 18:33 by wuguocheng
[基金申请] filecode +6 cratir 2026-08-14 10/500 2026-08-14 18:29 by 笑叹辞穷
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
信息提示
请填处理意见