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萝卜和香菜

新虫 (初入文坛)

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[求助] 表达载体分析已有1人参与

各位前辈，我想用同源敲除原理敲除效应蛋白，现在买了两个真菌表达载体，不知道多克隆位点在哪里？各位前辈谁用过这两个载体或者会分析的帮我分析一下。不胜感激。

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1楼 2020-08-24 15:20:10

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wangyuan0929

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
萝卜和香菜: 金币+5, ★★★很有帮助 2020-08-25 16:17:09

pCB1532H-RFP这个的多克隆位点看上去有两个——
4460~4470这一段，有5个酶切位点，2个PCR引物识别序列，附近还有启动子
716~744这一段，有5个酶切位点，2个PCR引物识别序列，附近也有启动子

pAN7-1这个质粒我没太看懂
可能是用潮霉素抗性基因（HPH）中间的位点进行连接？然后靠抗性筛选来找到阳性克隆吗？

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2楼2020-08-25 09:05:29

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萝卜和香菜

新虫 (初入文坛)

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2楼: Originally posted by wangyuan0929 at 2020-08-25 09:05:29
pCB1532H-RFP这个的多克隆位点看上去有两个——
4460~4470这一段，有5个酶切位点，2个PCR引物识别序列，附近还有启动子
716~744这一段，有5个酶切位点，2个PCR引物识别序列，附近也有启动子

pAN7-1这个质粒我没 ...

Pan7-1这个载体我想从BamHI这个酶切位点把他切开，然后连上去，会影响他的功能吗？

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3楼2020-08-25 16:21:19

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