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提莫爱蘑菇

铜虫 (小有名气)

[求助] 液相中盐酸二甲双胍出峰的迷惑行为……? 已有1人参与

用液相定位盐酸二甲双胍,开始用的C18柱,0.1%的磷酸水溶液和乙腈做流动相,出峰台靠前了,2.3min

后来查了一些资料,然后根据实际情况调整了流动相,改为了,0.005mol/l的磷酸二氢钾缓冲液,用磷酸调节PH=3.0,有机相为乙腈。

初始为5%的有机相走5min,然后8Min到70%有机相,维持5min再降回5%

用这个方法走的盐酸二甲双胍出了两个峰,走了两针,第一针我以为是没平衡好,然后又走了一针,结果发现还是两个峰………………

这是什么迷惑行为,求讲解……

我用PDA看了,第一个应该是盐酸二甲双胍的峰,吸收在232nm,后面一个最大吸收是200以下了,看不到。

以下附图
第一针
液相中盐酸二甲双胍出峰的迷惑行为……?


第二针
液相中盐酸二甲双胍出峰的迷惑行为……?-1
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2楼2020-08-18 16:53:34
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提莫爱蘑菇

铜虫 (小有名气)

好了,我已经知道了,问题可能出在梯度,后面那个是梯度峰

发自小木虫Android客户端
3楼2020-08-18 16:59:40
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提莫爱蘑菇

铜虫 (小有名气)

但是新问题,这个梯度峰为什么会出在这里…这么大,是不是不是梯度峰,我后来有调节了梯度,还是有峰,但是小了很多…

发自小木虫Android客户端
4楼2020-08-18 17:35:08
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如沨

木虫 (职业作家)

囧囧有神

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
0-5min  5%
5-8min  70%
8-13min 70%
13.1min 5%
楼主如果按照这个梯度走的话,很可能上一针基线没有平衡好。看你的条件在3分钟出峰,不明白楼主设定梯度的目的是什么,二甲双胍在C18上保留很弱,单纯的调整流动相比例改变甚小,可以参考中国药典方法采用磺酸基阳离子交换柱。
静坐常思己——过;闲谈莫论人——非!
5楼2020-08-19 14:49:41
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提莫爱蘑菇

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 如沨 at 2020-08-19 14:49:41
0-5min  5%
5-8min  70%
8-13min 70%
13.1min 5%
楼主如果按照这个梯度走的话,很可能上一针基线没有平衡好。看你的条件在3分钟出峰,不明白楼主设定梯度的目的是什么,二甲双胍在C18上保留很弱,单纯的调整流动 ...

我的总时间是,25min,平衡好了是肯定的,因为就是是第一针走,也是有后面的梯度峰的,我试着把梯度调缓了,多多少少还是会有个峰,虽然小了。
盐酸二甲双胍主要是杂质,不在死时间出峰就可以了
6楼2020-08-20 08:42:15
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