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2339773049新虫 (小有名气)
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pET质粒 已有2人参与
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请教一下 有两个pET32a+重组质粒，其中一个人为更换抗生素标签，这两个质粒在大肠中可以共存吗？容易丢失吗？ 谢谢 |
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雨独步
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3楼2020-08-15 19:52:12
donkey2014
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理论上不同复制子可以共存，实际以不同抗性施压也可以正常表达，我以前实验室有人经常这么干。但凡有一个质粒丢失，就失去了相应抗性，细菌就会死亡，所以保证抗生素够量就能保证含双质粒菌体一直扩增下去并表达蛋白。需要注意的是，如果是发酵罐高密度表达，Amp等β-内酰胺类抗生素会被逐渐消耗，相同复制子的质粒在细菌扩增传代过程中就可能会出现逐渐丢失的情况，所以不宜使用，可以使用其它抗性代替。摇瓶低密度表达不存在这个问题。 发自小木虫Android客户端 |
5楼2020-08-20 14:10:01
