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kimi_cheng

银虫 (初入文坛)

[交流] 大孔树脂纯化中药提取液的步骤及注意事项???

第一次做大孔树脂吸附,

大孔树脂纯化中药提取液的步骤及注意事项???

越详细越好!!!!谢谢了!!!
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塔矢亮

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
ynmyx(金币+1,VIP+0):谢谢您的热心解惑!! 11-10 17:13
我做新药,用过很多型号的大孔树脂
首先,新树脂要预处理:水淘洗后上柱----95%乙醇洗脱----洗脱直至一倍醇加四倍水不产生浑浊------水洗脱(醇水之间梯度过渡,否则产生大量气泡)-------洗脱到无醇味------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4小时-------水洗至中性-------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱------浸泡3-4小时------水洗至中性-------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4小时-------水洗至中性------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱------浸泡3-4小时------水洗至中性-------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4小时-------水洗至中性------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱------浸泡3-4小时------水洗至中性-------过渡到95%乙醇洗脱------过渡到水------水洗至无醇味。
这是比较规范的预处理,即要用酸碱各处理三遍,最后一遍要落实到碱上。
然后是上样,上样时柱子里必须是水,上样溶液也必须是水溶液。上样后最好过夜后再洗脱,使其充分吸附。
从水到95%乙醇进行梯度洗脱,例如可以分成水、30%、50%、70%、95%等,收集各部分洗脱液,浓缩,检测等等。
9楼2009-08-04 07:58:49
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honric

金虫 (正式写手)

★ ★
xy4585618(金币+1,VIP+0):3q 7-17 16:56
kimi_cheng(金币+1,VIP+0):谢谢!! 7-17 19:11
水溶液过滤或者离心后上柱,先水洗,再醇洗脱,收集醇洗脱液
完了,
具体根据你要纯化的成分来看
权,然后知轻重;度,然后知长短
2楼2009-07-17 10:46:20
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jinzhongchong

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
xy4585618(金币+1,VIP+0):3q 7-17 16:56
kimi_cheng(金币+2,VIP+0):谢谢 7-17 19:11
新买的大孔树脂要活化;
一般95%乙醇装柱,然后在60%-40%-20%-水的类似梯度置换成水,防止产生气泡,准备上样;
样品水溶解,离心取上清液加入柱中;
一般情况下,水-20%-40%-60%-95%梯度洗脱就好了。
3楼2009-07-17 13:42:01
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xy4585618

荣誉版主 (著名写手)

小木虫

★ ★
clkk216(金币+1,VIP+0):辛苦了斑斑~! 谢谢 ~! 7-17 18:47
kimi_cheng(金币+1,VIP+0):谢谢!! 7-17 19:11
上样前药液 需无醇味
柱子最好不要干,不要有气泡
是也罢,非也罢,是是非非争个啥。河东河西三十年,对的错啦,错的对拉!得也罢,失也罢,患得患失误年华。凡事该做尽管做,得了更好,失也没啥!
4楼2009-07-17 16:57:27
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