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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 中药学 » 大孔树脂纯化中药提取液的步骤及注意事项？？？
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kimi_cheng

银虫 (初入文坛)

[交流] 大孔树脂纯化中药提取液的步骤及注意事项？？？

第一次做大孔树脂吸附，

大孔树脂纯化中药提取液的步骤及注意事项？？？

越详细越好！！！！谢谢了！！！
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1楼 2009-07-17 08:11:14
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

塔矢亮

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
ynmyx(金币+1,VIP+0):谢谢您的热心解惑！！ 11-10 17:13
我做新药，用过很多型号的大孔树脂
首先，新树脂要预处理：水淘洗后上柱----95%乙醇洗脱----洗脱直至一倍醇加四倍水不产生浑浊------水洗脱（醇水之间梯度过渡，否则产生大量气泡）-------洗脱到无醇味------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4小时-------水洗至中性-------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱------浸泡3-4小时------水洗至中性-------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4小时-------水洗至中性------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱------浸泡3-4小时------水洗至中性-------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4小时-------水洗至中性------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱------浸泡3-4小时------水洗至中性-------过渡到95%乙醇洗脱------过渡到水------水洗至无醇味。
这是比较规范的预处理，即要用酸碱各处理三遍，最后一遍要落实到碱上。
然后是上样，上样时柱子里必须是水，上样溶液也必须是水溶液。上样后最好过夜后再洗脱，使其充分吸附。
从水到95%乙醇进行梯度洗脱，例如可以分成水、30%、50%、70%、95%等，收集各部分洗脱液，浓缩，检测等等。
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9楼2009-08-04 07:58:49
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普通回帖

honric

金虫 (正式写手)
★ ★
xy4585618(金币+1,VIP+0):3q 7-17 16:56
kimi_cheng(金币+1,VIP+0):谢谢！！ 7-17 19:11
水溶液过滤或者离心后上柱，先水洗，再醇洗脱，收集醇洗脱液
完了，
具体根据你要纯化的成分来看
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权，然后知轻重；度，然后知长短
2楼2009-07-17 10:46:20
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jinzhongchong

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
xy4585618(金币+1,VIP+0):3q 7-17 16:56
kimi_cheng(金币+2,VIP+0):谢谢 7-17 19:11
新买的大孔树脂要活化；
一般95％乙醇装柱，然后在60％－40％－20％－水的类似梯度置换成水，防止产生气泡，准备上样；
样品水溶解，离心取上清液加入柱中；
一般情况下，水－20％－40％－60％－95％梯度洗脱就好了。
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3楼2009-07-17 13:42:01
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xy4585618

荣誉版主 (著名写手)

小木虫
★ ★
clkk216(金币+1,VIP+0):辛苦了斑斑~！ 谢谢 ~！ 7-17 18:47
kimi_cheng(金币+1,VIP+0):谢谢！！ 7-17 19:11
上样前药液 需无醇味
柱子最好不要干，不要有气泡
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是也罢，非也罢，是是非非争个啥。河东河西三十年，对的错啦，错的对拉！得也罢，失也罢，患得患失误年华。凡事该做尽管做，得了更好，失也没啥！
4楼2009-07-17 16:57:27
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tyjackie

木虫 (正式写手)
★ ★
clkk216(金币+1,VIP+0):谢谢参与虫友讨论~！ 7-17 18:47
kimi_cheng(金币+1,VIP+0):谢谢！！ 7-17 19:12
1、提取液浓缩至无醇味、过滤
2、大孔树脂如果新买，需要进行“活化”处理，一般用水和乙醇交替洗脱数次
3、上样前的大孔树脂需要用水洗至无醇味
4、上样、洗脱过程中，树脂最好不要流干
5、上样过程中，洗脱剂一般从水开始，根据实际情况调节醇度，最后用95%乙醇冲柱
6、上完柱需要冲洗树脂，最好用95%乙醇液中保存
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5楼2009-07-17 18:24:58
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miaoxing6688

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
先进行大孔树脂的预处理
再装柱
先水洗
再用乙醇洗
上样
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6楼2009-07-23 10:53:21
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19861101

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 7-23 21:42
新的大孔吸附树脂要进行预处理，用5%的NaOH浸泡3个小时，最好晚上时处理，可以浸泡一个晚上，第二天白天的时候在用。在用盐酸洗至中性。水洗，醇洗，上样。
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7楼2009-07-23 11:40:31
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zww984716

金虫 (小有名气)

汉唐司令
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢回贴！ 7-23 21:43
一般都是（1）样品处理：样品溶解，过滤或离心都行。
（2）树脂柱预处理：一般都是先有95%的乙醇洗脱，除去树脂上的杂质，然后交换成水。（3）上样：注意上样是流速要慢；（4）洗脱:依次用浓度由低到高的乙醇水洗脱。
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像一杯酒，像一首老歌。。。吃着火锅，唱着老歌。。。
8楼2009-07-23 12:55:02
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heruhai

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
根据你要的成分吧  然后其他试剂洗脱也要注意
最关键看你要什么
然后参考上面虫友的
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10楼2009-08-04 14:43:47
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