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sshan826

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助:SDS-PAGE遇到的问题

刚接触电泳不久,有很多问题都不懂,想请教各位高手指点:
1、跑电泳时的电流大小会对蛋白质条带有什么影响;
2、我们跑出来的胶总是在最上面的比较清晰,下面的都连到一起了,这是为什么啊,有什么方法能让上面的
条带再往下跑些,再分离的开些,再清晰些?
3、条带越往下跑越胖,并且向一个方向偏是什么原因?
4、为什么我们的胶脱色后背景是花的,背景颜色很不均匀?
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做自己!
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siyuansu

新虫 (初入文坛)


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条带越往下跑越胖还有一个可能性就是 上洋量过大以至于胶内无法承载如此大量的蛋白 而且电流过大
ooooooooooooooo!
7楼2009-07-21 15:35:41
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由,人权之基。

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1. 基本没影响  太大可能带不均匀
2. 胶浓度过高,配低浓度的胶
3. 方向偏可能是胶底部有气泡。
4.配胶时可能染上了其他蛋白,不要用手直接接触胶板,胶板一定要洗干净
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
2楼2009-07-16 22:05:27
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sshan826

铜虫 (小有名气)

谢谢,顺便问一下,可以采用这种方法吗:待溴酚蓝跑出胶后再继续跑20min左右以使上面的条带再往下跑一点?如果可以,那缓冲溶液会不会因为溴酚蓝而污染?
做自己!
3楼2009-07-19 20:58:02
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cloudy3197

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
应该没问题吧,以前为了把蛋白条带拉开些都是溴酚蓝要跑出来的,应该就流在外槽吧,对里面的缓冲液没有影响。
4楼2009-07-19 22:52:02
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