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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助：SDS-PAGE遇到的问题
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sshan826

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助：SDS-PAGE遇到的问题

刚接触电泳不久，有很多问题都不懂，想请教各位高手指点：
1、跑电泳时的电流大小会对蛋白质条带有什么影响；
2、我们跑出来的胶总是在最上面的比较清晰，下面的都连到一起了，这是为什么啊，有什么方法能让上面的
条带再往下跑些，再分离的开些，再清晰些？
3、条带越往下跑越胖，并且向一个方向偏是什么原因？
4、为什么我们的胶脱色后背景是花的，背景颜色很不均匀？
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做自己！
1楼 2009-07-16 19:01:43
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houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由，人权之基。

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1. 基本没影响  太大可能带不均匀
2. 胶浓度过高，配低浓度的胶
3. 方向偏可能是胶底部有气泡。
4.配胶时可能染上了其他蛋白，不要用手直接接触胶板，胶板一定要洗干净
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从小就学习鲁迅，直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助，却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊！
2楼2009-07-16 22:05:27
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sshan826

铜虫 (小有名气)
谢谢，顺便问一下，可以采用这种方法吗：待溴酚蓝跑出胶后再继续跑20min左右以使上面的条带再往下跑一点？如果可以，那缓冲溶液会不会因为溴酚蓝而污染？
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做自己！
3楼2009-07-19 20:58:02
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cloudy3197

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
应该没问题吧，以前为了把蛋白条带拉开些都是溴酚蓝要跑出来的，应该就流在外槽吧，对里面的缓冲液没有影响。
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4楼2009-07-19 22:52:02
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sshan826

铜虫 (小有名气)
谢谢指点，非常感谢！
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做自己！
5楼2009-07-20 20:07:36
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caoliang38

铁虫 (小有名气)

向一个方向偏的问题。

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个问题我觉得还有一个可能是 我们的台子有点偏 所以无论是在配或者跑的时候都有可能跑偏 下次注意调整下台面吧
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6楼2009-07-21 10:14:17
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siyuansu

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
条带越往下跑越胖还有一个可能性就是 上洋量过大以至于胶内无法承载如此大量的蛋白 而且电流过大
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ooooooooooooooo!
7楼2009-07-21 15:35:41
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sshan826

铜虫 (小有名气)
谢谢各位不吝赐教！
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做自己！
8楼2009-07-21 20:02:17
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