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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 回收问题求助
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)

[交流] 回收问题求助

本人最近在做一个T载体上的目的片段回收，大小400bp左右，跑回收胶时已看到目的片段，割下来做回收，但是电泳验证时却没有目的条带。。请问是何问题？？
已排除试剂盒跟操作方法问题。。。
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1楼 2009-07-16 10:33:47
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poog502

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
假阳性，测序鉴定目的片段
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2楼2009-07-16 10:58:11
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wql1828

木虫 (小有名气)

helix
可能有   但是回收到量太少   电泳可能检测不出来
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3楼2009-07-16 11:20:42
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我遇到过，量太少
我一般是通过PCR再回收
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4楼2009-07-16 11:47:14
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)
恩，双酶切体系是50微升的，重复做了三次都没有回收到任何东西。。
今天决定提质粒PCR后做回收，希望有新的结果。。。
谢谢楼上各位的回答。。。
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5楼2009-07-16 12:46:37
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anik

银虫 (正式写手)
有没有检测过酶切效果？
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6楼2009-07-16 15:31:44
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liby

铜虫 (初入文坛)
★
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量太少的话用乙醇沉淀回收，或者胶回收时加了Elusion后，60度水浴10分钟提高洗脱效率
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7楼2009-07-16 17:05:39
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雨后郁金香

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 雨后郁金香 at 2009-7-16 12:46:
恩，双酶切体系是50微升的，重复做了三次都没有回收到任何东西。。
今天决定提质粒PCR后做回收，希望有新的结果。。。
谢谢楼上各位的回答。。。

恩，验证过了，酶切结果以及回收胶上都有我的目的片段。。可是就是回收的时候没有收回来。。。
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8楼2009-07-17 09:45:44
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
拿公司去测续吧~
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
9楼2009-07-17 10:04:50
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syn1985

木虫 (正式写手)
量太少看不见
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10楼2009-07-17 10:12:12
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