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由南往北

木虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2081.4
帖子: 688
在线: 93.6小时
虫号: 3537967

[交流] 抗原同其抗体的偶联方法

各位同仁好，

最近在设计试验的遇到一个问题，不知道该怎么解决，特向有经验的同行请教，感谢大家的回复！

我的问题是：我有一个心肌肌钙蛋白I的全长抗原（真核表达、原核表达都有），也有多种抗心肌肌钙蛋白I的单抗，现在我想把心肌肌钙蛋白I的抗原和抗心肌肌钙蛋白I的抗体通过化学方法共价偶联，得到一个抗原-抗体偶联物，作为其他项目的一种质控品。可以怎么操作呢？
我的想法是：
1、先将抗体的抗原结合区域切除，再进行偶联，但是可能存在切除不完全，也会丧失某些表位；
2、通过某种试剂对可变区进行封闭，然后偶联，偶联完成再将封闭位点释放，但是我不知道有没有这样的试剂，释放后会不会有自行结合了，可不可行，会不会对蛋白产生不好的影响；
3、不理会抗原抗体的结合，保证抗原/抗体中的某一种严重过量，按照偶联过程进行操作，偶联物过层析柱纯化，层析柱可以特异性结合耦联试剂（偶联试剂为小分子，纯化前经过透析除去），但是可行性未知。

以上均为个人想法，尚未付诸实施，不知道是否有大神进行过相关操作，能否指点一二，感激不尽！

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