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用户胡云云

新虫 (小有名气)

[求助] 关于PCR检测 已有3人参与

求助各位大神,我的靶标DNA只有17个碱基,你们知道有哪些标准方法可以检测吗?我自己知道的就qPCR,但是我的碱基太少了,引物都不好设计。导师说看能不能在我的靶标上增加碱基,比如ploy A这种,我没在文献里面看到过,感觉不太科学,你们有见过这种做法吗?

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duanbiao127

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可参考miRNA做qPCR的方法,设计茎环引物,做几轮预扩增,模板延长后即可定量扩增。(关注生物技术控公众号,了解更多生物实验技术)
5楼2020-08-12 11:01:24
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
ligation-------------->PCR,  先连接再做PCR吧

不过17个碱基很容易出现背景信号,产生假阳性
行至水穷处,坐看云起时
2楼2020-07-05 21:03:52
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用户胡云云

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2020-07-05 21:03:52
ligation-------------->PCR,  先连接再做PCR吧

不过17个碱基很容易出现背景信号,产生假阳性

好的,非常感谢

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3楼2020-07-05 22:20:08
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Liu19851225

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以杂交,扩增用PCR体系扩增,但扩增出来的产物不是指数型的
4楼2020-07-22 15:39:46
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